目的：臭氧是一种用于饮用水消毒的物理杀菌剂。本研究旨在探讨臭氧化三蒸馏水联合以埃索美拉唑为基础的三联疗法是否能提高幽门螺杆菌(Hp)的根除率，促进十二指肠溃疡的愈合。

  方法：采用碳14(14C)尿素呼气试验、快速尿素酶试验及病理检查，共确诊132例Hp感染阳性患者。随后将患者分为4组，每组33例。第1、2组为慢性胃炎，第3、4组为十二指肠溃疡。第1组和第3组患者采用标准的埃索美拉唑三联疗法，包括阿莫西林1g每日两次，克拉霉素0.5g每日两次，埃索美拉唑20mg，每日一次，铝碳酸镁片1片，每日三次。第2组和第4组患者饮用臭氧化三蒸馏水联合标准的埃索美拉唑三联疗法：每天300毫升臭氧三蒸馏水，阿莫西林1g每日两次，克拉霉素0.5g每日两次，埃索美拉唑20mg，每日一次，铝碳酸镁咀嚼片1片，每日三次。抗Hp治疗期为2周，随后为埃索美拉唑和铝碳酸镁治疗4周。第3、4组抗Hp治疗4周后进行胃镜检查，停药4周后进行14C尿素呼气试验。

  结果：胃镜检查第3组十二指肠溃疡21例处于愈合期，第4组29例处于愈合期，两组比较有显著性差异(P=0.022)。第1组26例14C尿素呼气试验阴性，Hp消除率为79%。第2组Hp清除率为97%(n=32)，第3组Hp清除率为73%(n=24)，第4组Hp清除率为94%(n=31)。卡方检验显示第1组和第2组之间以及第3组和第4组之间有显著性差异(p<0.05)。与标准的埃索美拉唑三联疗法相比，饮用臭氧三蒸馏水联合标准的埃索美拉唑三联疗法根除Hp的效果显著提高。

  结论：饮用臭氧化三蒸馏水配合标准治疗，可显著提高Hp根除率，促进十二指肠溃疡愈合。

  关键词：幽门螺杆菌;胃炎;十二指肠溃疡;臭氧三蒸馏水

显微镜下的幽门螺旋杆菌

  幽门螺杆菌(Hp)是目前已知的唯 一胃内细菌。Hp感染在慢性胃炎和消化性溃疡的发生发展中起重要作用，是胃癌、腺癌和胃粘膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤的危险因素。Hp被认为是一种致癌微生物，是最早被证实对人类具有致癌作用的原核生物。抗Hp治疗已成为Hp相关性慢性胃病的常规治疗方法。然而，近年来，抗药性已成为Hp根除失败的关键因素。探索发现新的治疗方案来治疗Hp似乎是医生和研究人员的首要任务。研究表明，臭氧以及氯，被广泛应用于饮用水处理中，主要用来杀灭大肠杆菌，并可能消除幽门螺杆菌。臭氧作为一种物理杀菌剂，与抗生素相比，在体内表现出不同的功能。在本研究中，我们研究了饮用臭氧化三蒸馏水和以埃索美拉唑为基础的标准三联疗法对幽门螺杆菌相关性慢性胃炎和十二指肠溃疡患者的治疗效果，并确定臭氧是否促进十二指肠溃疡病变的愈合。

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材料和方法

  病人招募

  招募共132名慢性胃病患者进行研究。年龄21～65岁，男性72例，女性60例。所有受试者均为上海市公共卫生临床中心门诊及住院患者，均因上腹痛、胃酸反流、便血、腹胀等症状就诊。所有患者均签署知情同意书。

  胃镜检查

  所有患者均经胃镜检查确诊。活动期十二指肠溃疡66例，慢性浅表性胃炎66例。

  患者Hp评价

  所有患者均经14C尿素呼气试验检测Hp阳性。采用奥林巴斯胃肠镜进行胃粘膜活检。进一步检查包括2个粘膜活检，幽门周围2-3厘米。通过快速尿素酶试验、组织病理学检查和粘膜活检Giemsa染色进一步证实Hp感染;病理学研究排除了癌性溃疡。治疗前后4周取血进行血清癌胚抗原检测。

  臭氧三蒸馏饮用水的产生

  采用制备好的臭氧化三蒸馏水。三蒸馏水中的臭氧浓度为每300毫升5ppm。臭氧三蒸馏水中不含溴酸盐。

  实验设计

  132例患者分为4组，每组33例。1、2组慢性胃炎33例，3、4组十二指肠溃疡33例。所有其他因素随机分组。

 抗Hp治疗

  第1组和第3组患者采用标准的埃索美拉唑三联疗法，包括阿莫西林1g每日两次，克拉霉素0.5g每日两次，埃索美拉唑20mg每日1次，铝碳酸镁咀嚼片1片，每日三次。第2组和第4组患者分别给予臭氧三蒸馏水和标准的埃索美拉唑三联疗法：300毫升臭氧三蒸馏水每日两次，阿莫西林1g每日两次，克拉霉素0.5g日两次，埃索美拉唑20mg每日1次，铝碳酸镁咀嚼片1片，每日三次。

  14C尿素呼气试验测定Hp根除率及胃镜检查十二指肠溃疡愈合期

  抗Hp治疗2周，埃索美拉唑和铝碳酸镁治疗4周。抗Hp治疗4周后，第3组和第4组患者进行第二次胃镜检查，停药4周后，对每名患者进行第二次14C尿素呼气试验检测Hp。 

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结果

  实验入组标准

  14C尿素呼气试验中超过100dpm诊断Hp感染。快速尿素酶试验，当放在试验室中的活检组织含有Hp时，试剂的黄色变为红色(图1)，表明活检胃粘膜中Hp呈阳性。病理检查提示胃镜下的患者活检胃腺固有层中存在大量弯曲杆状细菌Hp(图2)。

图1.尿素酶快速检测试剂盒。

 当活检样品放置在试验箱中几分钟后，黄色表示Hp阴性，当阳性时，其圆形黄色变为红色。

图2：病理检查证实胃镜活检的胃粘膜中有大量幽门螺杆菌。吉姆萨染色×400

  十二指肠溃疡的二次胃镜检查

  胃镜检查显示，第3组十二指肠溃疡愈合期21例，第4组十二指肠溃疡愈合期29例，治愈率分别为63.63%和87.88%。两组比较有显著性差异(P=0.022)。

表1：饮用臭氧化三蒸馏水对十二指肠溃疡愈合的影响。

注：3组：4组，P=0.022

图3：饮用臭氧化三蒸馏水联合埃索美拉唑三联疗法治疗前后十二指肠溃疡

  图3A显示了第一次内镜检查时的十二指肠溃疡;图3B显示了抗幽门螺杆菌4周后进行第二次内镜检查时的溃疡愈合阶段，该检查包括饮用臭氧三蒸馏水和标准埃索美拉唑三重疗法。

  第二次14C尿素呼气试验

  埃索美拉唑停药4周后，4个不同治疗组14C尿素呼气试验结果明显不同(表1)。第1组26例14C尿素呼气试验阴性，Hp消除率为79%。第2组Hp清除率为97%(n=32)，第3组Hp清除率为73%(n=24)，第4组Hp清除率为94%(n=31)。卡方检验显示1、2组与3、4组间有显著性差异(p<0.05)。

  结果表明，在慢性胃炎患者和十二指肠溃疡患者中，饮用臭氧三蒸馏水联合埃索美拉唑三联疗法根除幽门螺杆菌的效果均优于埃索美拉唑三联疗法。治疗期间未发现不良反应。治疗前后癌胚抗原水平稳定在0-5μg/ml之间。

表2: 治疗前后14C尿素呼气试验。治疗前后

注：1组：2组，P=0.02；3组：4组，P=0.02

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讨论

  质子泵抑制剂联合抗生素治疗Hp感染已成为慢性胃炎和消化性溃疡的常规治疗方法。根除Hp对改善功能性消化不良上腹部疼痛和烧灼感症状也有良好效果。通常，标准的三联疗法是由两种抗生素和质子泵抑制剂作为一线治疗。Hp的最 佳治疗方法应该保证根除率在90%以上。然而，成功根除Hp的疗法涉及许多决定因素，如个体原发性或继发性抗生素耐药性、粘膜药物浓度、患者依从性、副作用和成本。目前世界上大多数地区的标准三联疗法根除Hp率不到80%。研究表明，以阿莫西林、克拉霉素、埃索美拉唑为主的三联疗法治疗慢性胃炎和幽门螺杆菌感染的十二指肠溃疡患者的根除率分别为79%和73%。Hp对抗生素的耐药性降低了慢性胃病和消化性溃疡的临床治疗效果。此前的一项随机对照试验表明，臭氧纳米气泡水具有新型抗菌剂的潜力。Fontes等人证明，通过低剂量臭氧的雾化单次局部应用完全抑制了对抗菌剂具有耐药性的所有潜在致病菌株的生长。在体外，臭氧对多种耐药菌和导致牙周病代的细菌具有较强的杀菌作用。因此，臭氧在医学上可以作为初级治疗的辅助物。我们的研究表明，饮用臭氧化三蒸馏水有助于根除慢性胃炎和十二指肠溃疡患者胃粘膜中的幽门螺杆菌感染。这些发现表明，臭氧不仅可以用来消除水中的微生物，还可以治疗胃幽门螺杆菌感染。与传统药物治疗相比，臭氧治疗能加快胃粘膜修复，促进Hp根除，缩短胃溃疡恢复时间，减少复发机会，这与臭氧促进十二指肠溃疡损伤愈合的研究结果一致。包括静脉使用臭氧的生理治疗(自血疗法)，这些方法已被证明在改善临床症状、组织再生过程和根除幽门螺杆菌这三方面是有效的;然而，联合方案是最 佳的方案。我们的研究表明，在传统的抗生素加质子泵抑制剂治疗的基础上加入臭氧三蒸馏水，可以进一步提高Hp的根除率。这些结果表明，臭氧能提高传统抗生素加质子泵抑制剂治疗Hp的根除率，在今后Hp治疗中发挥更重要的作用。随着抗药性细菌的增多，臭氧独特的物理抗菌特性可能使处理变得更有价值和时间效率。

  然而，臭氧对消除Hp的作用还没有详细的报道，其机理尚不清楚。臭氧是一种强大的氧化剂。在工业中，它被广泛用作水、空气净化和设备清洗的抗菌剂，例如易腐物品的消毒、医疗器械的消毒以及清洁或表面处理工艺。臭氧是一种不稳定的气体;一旦产生，气态臭氧迅速分解为氧分子(O2)和有活性的氧原子(O)。这种气体无色，气味刺鼻，呈液体或固体形式可发生爆炸。在20°C时半衰期为40分钟，在0°C时约为140分钟，因此患者需要在十至二十 分钟内饮用现制备的臭氧水。臭氧消除微生物的生物和化学机制包括三种。首先，臭氧可能直接与细菌和病毒发生反应，破坏它们的细胞器、DNA和RNA。第二，臭氧可能穿透细胞膜，并与外膜上的脂蛋白和脂多糖发生反应，导致通透性突变，最终导致细胞溶解。Bialoszewski博士等证明臭氧水是一种有效的生物膜杀菌剂，作用时间只需30秒;臭氧-氧的混合气体的杀菌活性会降低，其中，将生物膜暴露于气态消毒剂的时间相对延长。在体外，臭氧水对细菌生物膜的破坏比臭氧-氧混合物更为有效。第三，臭氧可刺激Hp患者局部或全身细胞或体液免疫系统，诱导白细胞介素、白三烯和前列腺素释放，从而减轻炎症，促进伤口愈合。

  在整个研究过程中，没有发现任何副作用。Kawara博士和他的研究小组还证明，臭氧纳米气泡水(NBW3)在胃幽门螺杆菌治疗中维持其在很宽的pH范围内的消毒活性，并且对哺乳动物细胞或组织没有表现出细胞毒性;它们暗示胃蛋白酶以剂量依赖的方式抑制NBW3活性。臭氧作为一种无污染的水消毒剂，由于其不稳定，臭氧分解成氧分子和单个氧原子，氧原子再迅速相互结合，臭氧三蒸馏水中的臭氧不会留下有毒残留物。溶解在三蒸馏水中的臭氧一旦通过胃和肠就被释放出来，并通过胃粘膜消除幽门螺杆菌。在医疗用途中，由医用氧产生的臭氧以精确的治疗剂量给药，禁止吸入使用，并主张臭氧在龋齿中具有极好的健康益处，降低血液胆固醇和刺激抗氧化反应，改善静息肌肉的氧合，用于缺氧和缺血综合征的补充治疗。我们的研究表明，臭氧具有根除幽门螺杆菌的潜力，特别是当与标准治疗相结合时，可以提高幽门螺杆菌的根除率。此外，臭氧化三蒸馏水具有生产简单、安全、方便、经济等优点。因此，应进一步的研究和发现，以确定消除Hp的臭氧三蒸馏水的最 佳和安全浓度。臭氧可能成为一种更广泛应用的治疗方法，以对抗细菌感染。